Грама метод

Взятие гинекологического мазка

Гинекологический мазок берут для оценки состояния половых путей женщины. Анализ клеток из влагалища и цервикального канала помогает выявить хронические воспаления, половые инфекции, обнаружить развитие женской онкологии на ранних стадиях.

В профилактических целях мазки берут ежегодно у всех женщин репродуктивного возраста. Внеочередной забор материала может понадобиться при:

• подготовке к беременности или процедуре ЭКО;
• появлении тревожных симптомов – зуд, жжение, высыпания, бородавки в интимной зоне, нарушение менструального цикла;
• после полового контакта с новым партнером (без барьерной контрацепции);
• при частых абортах и неоднократных выкидышах;
• после длительной терапии гормонами или антибиотиками.

Нерегулярный цикл

Случайные связи

Терапия гормонами

Женщинам с отягощенной наследственностью мазок из шейки матки и влагалища рекомендуют сдавать 2 раза в год. Взятие мазка из половых путей женщин проводит гинеколог во время осмотра пациентки на кресле. Врач собирает биоматериал из влагалища, наружного зева матки и канала шейки матки.

Гинекологический мазок на флору

Материал помогает оценить степень микробной чистоты влагалища. Взятие мазков на флору – безболезненная процедура. Однако результаты этого анализа дают врачу важную информацию о состоянии естественной микрофлоры и заражении патогенными микроорганизмами.

Исследование позволяет диагностировать такие патологии:

• вагинит;
• гонорея;
• кандидоз;
• трихомониаз;
• цервицит и другие болезни, вызванные патогенной флорой.

Для анализа состава микрофлоры применяют метод микроскопии с окрашиванием по Граму. Методика основана на способности бактериальной клетки по-разному реагировать на контакт с анилиновыми красителями:

• Грамположительные бактерии – окрашиваются в синий (фиолетовый) цвет. Эти микроорганизмы отличаются простым строением, а их клеточная оболочка очень чувствительная к воздействию антибактериальных препаратов.  
• Грамотрицательные бактерии – при воздействии красителя обесцвечиваются. Их клеточная стенка имеет сложное строение. Это позволяет им сохранять устойчивость к большинству антибиотиков. Именно грамотрицательные бактерии чаще всего вызывают патологии женской половой системы.   

После окрашивания по Граму и исследования материала под микроскопом, используют метод бактериологического посева клеток на питательную среду. Оказавшись в благоприятных условиях микроорганизмы начинают активно расти, образуя колонии. Эти колонии идентифицируют, после чего испытывают на чувствительность к антибиотикам

Это важно для назначения эффективного лечения

Взятие мазка на чистоту влагалища точно определяет возбудителя болезни и оценивает его чувствительность к антибактериальным препаратам разных групп.

Мазок на скрытые инфекции

Ряд заболеваний половой системы протекают без симптомов и могут никак не проявлять себя на протяжении многих лет. При этом они нарушают половую и репродуктивную функцию, вызывают бесплодие, нарушают развитие плода во время беременности.

К скрытым инфекциям относят:

• гонорею;
• сифилис;
• генитальный герпес;
• вирус папилломы человека;
• уреаплазмоз;
• хламидиоз.

После взятия мазка на скрытые инфекции, материал направляют в лабораторию для проведения ПЦР-диагностики. Техника позволяет точно определить специфические ДНК молекулы патогенных микроорганизмов. Методика очень точная и чувствительная. Даже одна микробная клетка в образце может быть выявлена во время анализа.  

Взятие мазка на онкоцитологию

Это анализ клеточной структуры тканей половых органов. Взятие мазка из цервикального канала проводят при подозрении на дисплазию эпителия и онкологию. Это наиболее эффективный способ ранней диагностики злокачественных опухолей. Забор мазка из цервикального канала также информативен при хроническом воспалении и половых инфекциях.

В лаборатории мазок на онкоцитологию окрашивают и исследуют под мощным микроскопом для выявления аномалий и дефектов строения клеток. По результатам взятия мазков на цитологическое исследование пациентка получает один из пяти типов цитограмм:

• 1 класс – атипичные клетки отсутствуют (норма);
• 2 класс – выявлены воспалительные изменения структуры клеток;
• 3 класс – имеются выраженные признаки дисплазии ткани;
• 4 класс – подозрения на рак и эрозию шейки матки;
• 5 класс – онкологический процесс.

Дифтерийные коринебактерии (Corynebacterium diphtheriae)

Это грамположительные неподвижные анаэробные бактерии, обычные обитатели кожной микрофлоры. Они делятся на два вида: дифтерийные и недифтерийные. Дифтерийные коринебактерии (ДК) в свою очередь подразделяются на токсикогенные и нетоксикогенные. Последние способны спровоцировать заражение крови, септический артрит, эндокардит и воспаления костного мозга. Оба вида, как правило, присутствуют в кожных язвах алкоголиков, у инъекционных наркоманов, а также в местах с низким уровнем гигиены и социально-экономическим уровнем развития. Вакцинация избавила развитые страны от дифтерии, но, тем не менее, заболевание сохраняется у людей из низших слоев общества и тех, кто не прошел вакцинацию.

Сдать мазок из влагалища на дому

По многим причинам личное посещение гинеколога невозможно или не желательно для пациентки. В этом случае можно воспользоваться предложением нашей клиники по вызову врача на дом. Плюсы таковы:

• Нет необходимости тратить время на поездку в клинику, заполнение бланка, ожидание очереди к специалисту;
• Сохраняется приватность, нет риска встретить кого-либо в клинике, с кем не хотелось бы делиться личными проблемами;
• Для маломобильных лиц – это выход из положения. Речь идет о престарелых людях, инвалидах, людей, страдающих психическими заболеваниями, фобиями, послеоперационных и ослабленных больных. Для них посещение клиники практически невозможно, либо сопряжено с большими трудностями;
• Для очень занятых людей – сдача мазка на дому экономит время;
• Нет необходимости покидать жилье для посещения врача, когда не с кем оставить без присмотра маленьких детей и стариков;
• Сдача мазка происходит в родных стенах, а значит в комфортной и привычной обстановке;
• Забор биоматериала на анализ в домашних условиях ничем не отличается от такового в стенах клиники, качество ничем не уступает;
• Можно также получить рекомендации и назначение врача;
• Мазок отправляется в лабораторию. А пациентка получает результат в виде бумажного или электронного носителя курьерской или другой доставкой по желанию.

Собственная лаборатория нашей клиники обеспечивает получение точных результатов тестов за кротчайший промежуток времени. А выезд врача для сдачи мазка на анализ – в день обращения.

Чтобы результат анализа был адекватным и соответствовал истине, должна быть высокая квалификация у врача-гинеколога и лаборанта, производящего анализ. Наша клиника гарантирует высокое качество.

Полезная информация по теме:

• Гинекология как наука о женских заболеваниях
• Консультация гинеколога
• Как проходит прием гинеколога
• Женский доктор
• Диагностика половых инфекций у женщин
• Диагностика гинекологических заболеваний
• Лечение женских заболеваний
• Детский гинеколог
• Как проводится осмотр гинеколога
• Платный гинеколог

Значение для медицины

Одна из нескольких уникальных характеристик грамотрицательных бактерий — это структура внешней клеточной мембраны. Внешний лист мембраны включает в себя комплекс липополисахаридов, липидные части которых выполняют роль эндотоксинов. Если эндотоксины попадают в транспортную систему, происходит интоксикация, с последующим увеличением температуры, повышением частоты дыхания и понижением кровяного давления. Всё это может привести к токсическому шоку и последующему летальному исходу.

Эта внешняя мембрана защищает бактерию от некоторых антибиотиков, красителей и детергентов, которые в норме повреждают внутреннюю мембрану или клеточную стенку. Такая защита делает бактерию устойчивой к лизоциму и пенициллину. Однако были разработаны альтернативные методы лечения, такие как лизоцим с ЭДТА и антибиотик ампициллин, способные справиться с защитной внешней мембраной некоторых патогенных грамотрицательных организмов. Для этой же цели могут быть использованы и другие лекарства, наиболее эффективные из которых хлорамфеникол, стрептомицин и налидиксовая кислота.

Расшифровка анализа

Некоторые отклонения могут быть также зафиксированы с помощью мазка:

1. Шаровидная бактерия (кокк) или «двойная палочка» (диплококк) — опасные симптомы. Например, если женщина узнала о наличии диплококка или гонококка в анализе — ей стоит проверить себя еще раз. Такие показатели могут говорить о заболеваниях, в частности — означать гонорею. Флора половых органов при таких заболеваниях разрушается.
2. Если флора проявит себя в результатах мазка наличием гарденелл — это тоже может быть симптомом заболевания. Так называемая «маленькая палочка» — бактерия-возбудитель дисбактериоза во влагалище.
3. Мазкий материал также может содержать атипичные клетки. Они еще называются ключевыми. Настораживает любое их количество. Мелкая палочка склеивается с клеткой плоского эпителия и формирует этот негативный симптом проблем во влагалище, что вполне может означать, например, что флора дисбактериальна.
4. Анализ также может показать наличие грибка в образце мазка. Это будет говорить о протекании кандидоза или молочницы. Если женщина не испытывает симптомов этого заболевания, то мазкий материал не будет содержать грибка. На данном этапе он будет отсутствовать в анализе. Однако мазок покажет некоторое количество спор, по которым доктор сможет определить и диагностировать молочницу.

Обязательно нужно говорить со своим врачом и о том, что в случае негативных проявлений — анализ не является диагнозом. Женщина обязательно должна пройти дополнительный осмотр, некоторое количество процедур, ведь любая бактерия, будь то кокк или палочка, не могут быть однозначным свидетельством заболевания и точно означать конкретную болезнь.

Пропионибактерии акне (Propionibacterium acnes)

Часто называемые причиной обыкновенных угрей, пропионибактерии акне (ПА) – это грамположительные анаэробные бациллы, производящие пропионовую кислоту – побочный продукт их метаболизма. ПА населяют сальные железы, питаются жирными кислотами кожного сала, при этом они чувствительны к ультрафиолетовому излучению.

Считается, что ПА становятся причиной таких заболеваний, как фолликулит, саркоидоз, а также системных инфекций, приводящих к эндокардиту. Иногда ПА провоцирует SAPHO-синдром (синовит, акне, гнойничковые высыпания, гиперостоз и остит) – хроническое системное воспалительное заболевание. В сальных железах ПА производят свободные жирные кислоты. Этот побочный продукт их жизнедеятельности раздражает стенки фолликулов и вызывает воспаление, которое и приводит к кожным инфекциям.

Наиболее распространенное заболевание, которое связывают с ПА, — это акне, поражающее до 80% подростков. Однако есть факторы, предрасполагающие их появлению: преобладание мужских гормонов, медикаментозная терапия (гормональная или контрацептивная), стресс и наследственность.

Невоспаленные акне – это открытые или закрытые комедоны, воспаленные – узелки, прыщи, гнойнички и пузырьки.

Как и эпидермальный стафилококк, ПА становятся причиной послеоперационных инфекций. Искусственные суставы, катетеры и сердечные клапаны транспортируют кожную микрофлору в организм. В результате возникают системные инфекции, а потом сепсис или эндокардит. Другим способом проникновения ПА в организм могут стать повреждения глаза или офтальмологические операции. Это ведет к эндофтальмиту – воспалению внутреннего глаза с временной потерей зрения. Позднее возникновение инфекции – чаще всего результат низкой вирулентности фенотипа ПА.

Лечение подобных заболеваний зависит от многих факторов. Для терапии и предотвращения акне существует множество средств, например, перекись бензоила и наружные антибиотики, они дезинфицируют кожу и защищают ее от бактерий. Наружные ретиноиды снимают воспаления фолликулов. Оральные антибиотики назначаются пациентам с умеренной формой акне. Кроме сокращения внешних проявлений заболевания, антибиотики оказывают еще и противовоспалительное действие. Однако единственное на сегодняшний день средство, ведущее к постоянной ремиссии, — это изотретиноин – составляющее витамина А. Редко случающиеся системные инфекции, включая эндокардит, развивающиеся после операций у пациентов с низким иммунитетом, эффективно лечат пенициллином или ванкомицином.

Основными факторами, способствующими развитию акне, являются ороговение корней волос, повышенная выработка кожного сала и излишнее количество ПА. Хотя эти бактерии часто связывают с появлением акне, они населяют и микрофлору абсолютно здоровых людей. А исследования доказывают, что антибиотики в первую очередь снимают воспаление и только потом сдерживают рост ПА. Широкое распространение пропионибактерий акне на здоровой коже дает основание предполагать, что они являются мутуалистами, а не паразитами.

Синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa)

Это грамотрицательные аэробные бактерии, производящие флюоресцирующие молекулы: сине-зеленые, желто-зеленые и красно-коричневые. Синегнойную палочку (СП) легко отличить по цвету и сладковатому запаху.

СП населяет нестерильные предметы и, подобно эпидермальному стрептококку, считается составляющей нормальной микрофлоры здорового человека. Безобидные бактерии располагаются на коже и во рту, но при этом способны поразить любые ткани, с которыми вступят в контакт. Благодаря относительной безопасности СП, инфекции поражают только лиц со сниженным иммунитетом и больничных пациентов. Среди них муковисцидоз, бронхоэктаз, нейтропения, гематологические и злокачественные заболевания.

Основной источник заражения – поврежденная кожа. Проникновение бактерий в кровь ведет к инфекциям костей, суставов, пищеварительной системы, респираторным и системным заболеваниям. На коже СП чаще всего вызывает дерматит или поражения более глубоких мягких тканей. Такие случаи – это, как правило, результат контакта с зараженной водой. Обычно инфекции носят легкий характер и легко лечатся наружными антибиотиками. В более сложных случаях антибиотики вводят инъекционно.

Несмотря на разнообразие вызываемых СП заболеваний, эти бактерии обладают защитными свойствами. Некоторые побочные продукты их жизнедеятельности используются в изготовлении лекарственных средств. Одним из наиболее известных является мупироцин –средство борьбы с инфекциями, вызванными патогенами стафилококка и стрептококка.

Безусловно, СП является мутуалистом, поддерживая уникальную микросреду между организмом и микробами. Удаление СП из микрофлоры приведет к неконтролируемому росту грибков. Поэтому присутствие на коже и слизистых СП предохраняет организм от поражения более болезнетворными бактериями, являясь неотъемлемой частью иммунной системы.

Осложнения бактериального вагиноза. Зачем нужно лечить патологию

Нелеченый BV по восходящему пути может вызвать цервицит, дисплазию эпителия, эндометрит. Воспалительные процессы в органах малого таза (воспалительное заболевание тазовых органов) приводят к полному бесплодию или привычным выкидышам. Если женщине удалось забеременеть, можно ожидать, преждевременных родов, послеродового мукозита и мышечного воспаления. Также возможен перинеальный абсцесс.

Во время беременности течение инфекции по восходящему пути усиливается за счет выделяемых из бактерий эндотоксинов, которые активируют лейкоциты. Активные многоядерные лейкоциты выделяют связанные протеазы: каталазу, пероксидазу и плазмин. Протеазы, особенно плазмин, синтезируют коллагеназу, которая гидролизует коллаген в амниотических клетках, вызывая преждевременный разрыв плодного пузыря. 

В то же время активные лейкоциты иммунологическим путем активируют макрофаги, секретирующие цитокины: интерлейкин 1 (IL-1), интерлейкин 1b (IL-1b), интерлейкин 6 (IL-6), интерлейкин 8 (IL-8) и фактор некроза опухоли и стимулирует клетки мембраны производить цитокины. Повышение концентрации цитокинов в цервикальном канале вызывает синтез препростагландинов,2 и PGF 2a. Простагландин PGE 2 отвечает за укорачивание шейки матки, а простагландин PGF 2α, вызывая сокращения матки, вызывает преждевременные роды.

Хотя бактериальный вагиноз – это инфекция, которая возникает только у женщин и не квалифицируется как заболевание, передающееся половым путем (ЗППП), она может вызывать негонококковый уретрит, простатит и придаток яичка и последующее бесплодие у мужчин. Любая партнерша мужчины с перечисленными выше состояниями, у которого в моче или мазках культивирована анаэробная флора, должна быть обследована на бактериальный вагиноз.

Подготовка к получению материала

Взятие мазка у гинеколога простая процедура. Однако, чтобы получить достоверный результат, к ней следует правильно подготовиться. Материал не берут во время менструации, поскольку кровянистые выделения могут попасть в пробу и повлиять на качество результата. Это необходимо учитывать при планировании даты посещения гинеколога.

Подготовка к забору соскоба включает простые рекомендации:

• за 2-3 дня нужно прекратить использование вагинальных препаратов, интимной косметики, лубрикантов;
• за 5-7 дней желательно отказаться от спринцевания;
• в течение 2-3 суток рекомендуется сохранять половой покой;
• в день забора нужно проводить интимную гигиену только с помощью теплой воды без антисептических гигиенических средств.

Источники

1. ↑
2. ↑ Гусев М. В., Минеева Л. А. Микробиология: Учебник. — 2003. − 464 с.
3. (Hoiczyk и Baumeister, 1998; Hoiczyk, 2000)
4. Lee R. E. Phycology. — 4th Ed. — Colorado State University, USA.
5. ↑ Gupta R. S. (1998) Protein phylogenies and signature sequences: A reappraisal of evolutionary relationships among archaebacteria, eubacteria and eukaryotes. Microbiol. Mol. Biol. Rev. 62: 1435—1491.
6. ↑ Gupta R. S. (2000) The natural evolutionary relationships among prokaryotes. Crit. Rev. Microbiol. 26: 111—131.
7. ↑
8. ↑
9. ↑ Gupta R. S. (1998). What are archaebacteria: life’s third domain or monoderm prokaryotes related to Gram-positive bacteria? A new proposal for the classification of prokaryotic organisms. Molecular Microbiology. 29(3):695-707.
10. ↑ Gupta R. S. (2011). Origin of diderm (Gram-negative) bacteria: antibiotic selection pressure rather than endosymbiosis likely led to the evolution of bacterial cells with two membranes. Antonie van Leeuwenhoek. 100:171—182.
11. ↑

Результаты мазка

Врачом лаборантом при проведении мазка на флору у женщин в анализе выделения могут быть обнаружены следующие образования:

1. Плоский эпителий — слой клеток, выстилающий влагалище и шейку матки. В норме эпителий должен присутствовать. Отсутствие его в результате мазка свидетельствует об атрофии эпителиальных клеток.

2. Лейкоциты в анализе на флору у женщин — норма до 15 единиц в поле зрения (в мочеиспускательном канале до 5, во влагалище до 10 и в шейке матки до 15 единиц в поле зрения). Количество лейкоцитов в мазке у женщин резко возрастает при воспалении влагалища (кольпит, вагинит). Чем больше лейкоцитов, тем острее протекает заболевание. При остром воспалении значение этого показателя результата мазка на флору будет «до 100 в поле зрения» или «покрывают все поле зрения».

3. Палочки в анализе мазка на флору составляют нормальную микрофлору влагалища. Кроме палочек гинекологический мазок на флору не должен содержать других микроорганизмов.

4. «Ключевые» клетки в мазке — это гарднереллы — возбудители гарднереллеза. Дрожжевые грибы — признак кандидоза (молочницы). В скрытых (бессимптомных) стадиях молочницы грибок в мазке может обнаруживаться в виде спор.

5. Лептотрикс (Leptothrix) — анаэробная грамотрицательная бактерия. Чаще всего лептотрикс встречается при смешанных половых инфекциях — трихомониазе и хламидиозе, при кандидозе и бактериальном вагинозе. Определение его в мазках из влагалища должно настораживать врача и предусматривать дальнейшее более углубленное обследование женщины, чем просто анализ на флору.

6. Мобилункус — анаэробный микроорганизм, один из представителей транзиторной микрофлоры мочеполовых органов. Часто встречается у женщин с бактериальным вагинозом и кандидозом.

7. Трихомонада — простейший микроорганизм, представляет собой подвижный одноклеточный организм со жгутиком, вызывающий воспалительные заболевания мочеполовой сферы.

8. Гонококки (диплококки) — возбудители гонореи — в анализе мазка у здоровых пациенток не определяются.

«Хороший мазок»

Расшифровка хорошего мазка в на флору характеризуется наличием следующих показателей:

1. Плоский эпителий — слой клеток, выстилающий влагалище и шейку матки. В нормальном мазке эпителий должен присутствовать. Если же эпителия не содержится, то у гинеколога есть основание предположить недостаток эстрогенов, избыток мужских половых гормонов, атрофию эпителиальных клеток.
2. Лейкоциты — норма до 15 — 20 единиц, они препятствуют инфекции в гениталиях. Повышенные лейкоциты в мазке наблюдаются при воспалении (кольпит, вагинит). Чем их больше, тем острее протекает воспаление.
3. Золотистый стафилококк в небольших количествах — норма. Значительное повышение может быть симптомом воспалительного процесса во влагалище, слизистой оболочки матки (эндометрит).
4. Палочки составляют нормальную микрофлору влагалища. Кроме палочек, в хорошем мазке не должно быть других микроорганизмов.
    

«Плохой мазок»

Результаты мазка на флору может содержать патологические микроорганизмы, указывающие на наличие той или иной половой инфекции. В расшифровке врач-лаборант может указать следующие бактерии, характерные для «плохого» анализа мазка у женщин:

1. Кокки — в отличие от палочек это шаровидные бактерии. Кроме них, могут содержаться диплококки — двойные палочки или гонококки.
2. Мелкие палочки — это чаще всего гарднереллы — возбудители гарднереллеза или дисбактериоза влагалища.
3. «Ключевые» клетки в мазке (нетипичные, плохие клетки для флоры влагалища) — это фрагменты плоского эпителия, склеенные с мелкой палочкой. Такие мазки мазки — плохие, т.к. содержат ключевые клетки, и гинеколог может поставить диагноз — дисбиоз/гарднереллез.
4. Грибок — признак кандидоза (молочницы). В скрытых стадиях грибок может обнаруживаться в виде спор.
5. Если в наличии вагинальные трихомонады, есть все основания предположить трихомониаз.

Количество той или иной флоры обозначают знаком «+».
Всего их выделяют 4 категории:

• «+» — величина показателя незначительная;
• «++» — количество показателя умеренное;
• «+++» — увеличенное количество показателя;
• «++++» — завышенное (обильное) количество; 
• «abs» — отсутствие того или иного элемента.
 

Техника окраски по Граму

Для окраски необходимо следующее: карболовый р-р красителя трифенилметановой группы (генцианвиолет, кристаллвиолет или метилвиолет); раствор Люголя (2 г йодистого калия, 1 г йода кристаллического, 300 мл дистиллированной воды) щелочной или нейтральной реакции; спирт 96% нейтральной реакции; р-р контрастной краски (фуксин Пфейффера, 1% водный р-р нейтральрота и др.).

Мазок, фиксированный жаром, окрашивают генцианвиолетом или другим красителем 1—2 мин., промывают водой и наливают на препарат р-р Люголя (на 1 мин.), после чего дифференцируют спиртом 7 г — 1 мин. до появления серо-фиолетовых струек краски. Затем препарат промывают водой и докрашивают одной из контрастных красок. Грамположительные бактерии окрашиваются в фиолетовый цвет, грамотрицательные бактерии, клетки и ткани — в красный. Предложены различные модификации метода Грама — А. И. Синева (применение генцианвиолетовой бумажки вместо карболового р-ра краски), Г. П. Калины, Хаккера (G. J. Hucker), Берк (V. Burke) и др.

Зачем сдавать мазок на биоценоз

Стерильным влагалище женщины бывает лишь первые несколько часов жизни после появления на свет. Потом его начинают заселять различные микроорганизмы. Полезные бактерии образуют на слизистой защитную биоплёнку, препятствующую проникновению внутрь болезнетворных бактерий и поддерживающую местную иммунную систему для сохранения детородной функции. При нарушении количественного и качественного состава биофлоры, слизистую заселяют патогены, вызывающие гинекологические заболевания.

В результате женщина чувствует боль, зуд, неприятный запах, развивается воспаление, приводящее к серьезным осложнениям, например, к бесплодию.